MANIPULACION Y PROCESADO DE MUESTRAS DE SANGRE

GRUPO LEBBYAC	PROCEDIMIENTOS PREANALITICOS MANIPULACION Y PROCESADO DE MUESTRAS DE SANGRE	MAPo-008-5.4 MA3.III.A.3 Rev. 1.3
Quality Assurance		Hoja Nº 1/2

OBJETIVO:

Normatizar el procedimiento de preparación de muestras de sangre previamente al proceso analítico. De esta manera se minimizan los errores al centrifugar y separar sueros.

ALCANCE:

Se aplica al procedimiento de preparación y separación de muestras. Aplica a todos los laboratorios del grupo.
Aplica a todos los laboratorios del grupo, Laboratorio LEBBYAC, Laboratorio IMA y Laboratorio Dra. Celia Buceta.

DEFINICIONES:

LIS:"Laboratory Information System" Sistema de Laboratorio.

RESPONSABLES:

Director técnico, extraccionistas, Técnicos

DESARROLLO:

INTRODUCCION

Esta guía especifica criterios que asisten en el reconocimiento y reducción o eliminación de errores preanalíticos resultantes de un inapropiado manipuleo de las muestras de sangre. Adaptado y modificado del documento del CLSI H18-A3-Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory Tests
Especifica el manejo y procesamiento de las muestras de sangre para determinaciones analíticas utilizando suero, plasma o sangre entera en el laboratorio clínico. Las variables asociadas con las fases de precentrifugation, centrifugación y postcentrifugation y procesamiento de muestras se enfatizan. Cuando corresponda, las recomendaciones deberían ser consideradas por las siguientes áreas de laboratorio: química, coagulación, hematología, Inmunología, serología, toxicología, monitoreo farmacológico, virología, y biología molecular.
El presente procedimiento contempla los múltiples factores asociados con el manejo y procesamiento de las muestras de sangre. Estos factores pueden introducir inexactitud en los resultados o desvios sistemáticos después de que el espécimen ha sido recogido pero antes de realizar la prueba. Criterios de performance para dispositivos de recolección de sangre también se tienen en cuenta.
Se enumeran situaciones especificas relacionadas con el contacto prolongado de suero o plasma con células, con tubos, tapones; hemólisis; cambios de la concentración de analito debido a la evaporación; temperatura de almacenamiento incorrecto; el uso de anticoagulantes y dispositivos de separación de suero o plasma; transporte incorrecto; y tiempo de respuesta (TAT) para resultados de los pacientes. El reconocimiento y control de estas variables deben reducir errores y contribuir a la utilidad médica de los resultados.

La fase preanalítica incluye:

    * La solicitud / pedido, el extraccionista debe verificar los analisis solicitados con la orden original.
    * La identificación del paciente antes de extraer una muestra,
    * La muestra adecuada (por ejemplo, un 'top tubo rojo'),
    * Cantidad suficiente de la muestra
    * La muestra tomada en el orden correcto,
    * Evitar la hemólisis mientras se toma la muestra,
    * El tiempo que se necesita para entregar la muestra al laboratorio y
    * El tiempo necesario para introducir la muestra en la fase analítica.

La fase preanalítica es la parte más vulnerable del proceso total de prueba y es considerado como uno de los mayores desafíos para los profesionales de laboratorio. Una serie de normas relativas a la toma de muestras de sangre, el transporte y manipulación de muestras están disponibles.
De acuerdo con datos fiables, los errores preanalíticos siguen representando casi el 50% - 70% de todos los problemas que ocurren en el diagnóstico de laboratorio. Aunque la mayoría de estos errores son "interceptados" antes de que se tomen las reacciones inapropiadas, en casi el 20% de los casos se producen investigaciones inadecuadas, incluidas mas pruebas innecesarias y, por lo tanto, el aumento injustificado de los costes, al tiempo que genera las decisiones clínicas inadecuadas y causando algunas circunstancias desafortunadas. Por ejemplo, "Fuera de todos los problemas de laboratorio, hasta un 61% están asociados a la fase preanalítica. Fuera de esto, el 33% de los errores se asocian con los formularios de solicitud de las pruebas, el 18% de los errores con la recogida de muestras."

Precauciones estandar

Dado que a menudo es imposible saber lo que podría ser infeccioso, todas las muestras del paciente y de laboratorio son tratados como contagiosos y manejado según "Precauciones estándar". Las precauciones estándar son directrices que combinan las características principales de las prácticas "precauciones universales y aislamiento".
Las precauciones estándar cubren la transmisión de todos los agentes infecciosos y por lo tanto son más comprensivos que las precauciones universales que se aplican sólo a la transmisión de patógenos de la sangre.
Directrices de precauciones estándar y universal están disponibles en los centros para el Control de la enfermedad y Prevención (pauta para precauciones de aislamiento en los hospitales. Hospital y Control de infecciones Epidemiología. CDC. 1996; 1:53-80 y 1988 MMWR; 37:377-388). Para precauciones específicas para prevenir la transmisión de laboratorio de todos los agentes infecciosos de instrumentos de laboratorio y materiales y para las recomendaciones para el manejo de la exposición a todas las enfermedades infecciosas, se refieren a la mayoría la edición actual del documento CLSI M29-A3 — protección de los trabajadores de laboratorio de Infecciones adquiridas laboralmente.

Separacion de suero o plasma

Recommendacion: Suero o plasma debe ser separado lo mas pronto posible, salvo en casos donde se demuestre que puede permancer mas tiempo sin separase. El limite maximo se de DOS HORAS
NOTA: Un tiempo menor a dos horas se recomienda para Potasio, ACTH, Cortisol, Catecolaminas y homocisteina. Ver recuadro

< 1 hora	< 2 horas	Hasta 48 horas
Potasio ACTH Cortisol Catecolaminas Homosisteína Glucosa LDH Hierro	El resto de las determinacions no listadas en las otras dos columnas	Albumina FAL GPT Bilirrubina Calcio Colesterol CK Creatinina Magnesio Sodio Proteinas T3 T4 Urea Acido úrico Amilasa

TUBOS UTILIZADOS

Color de la tapa	Anticoagulante	Muestra	Aplicación	Observación
CELESTE	Citrato de sodio	Plasma	Coagulación
LILA	EDTA	Sangre total	Hematología HbELE
VERDE	Heparina	Plasma	Química
NEGRO	Citrato de sodio	Plasma	ERITRO
ROJO O AMARILLO	Sin Anticoagulante	Suero	Química, inmunología, endocrinología y pruebas serológicas.	Contiene gel separador de suero y elementos celulares

Fase de precentrifugado

Recommendaciones:

Los tubos con EDTA se deben invertir de cinco a diez veces, los que contienen Citrato de tres a cuatro veces.
Las muestras para SUERO deben coagular antes de ser centrifugadas.
Las muestras que requieren PLASMA se deben separar tan pronto como sea posible
los tubos deben permanecer en posición vertical.
Tratar de evitar la hemolisis. Los test SERIAMENTE afectados por la hemoilsis son: LDH, Potasio y GOT. Los test MODERADAMENTE afectados son: Fosforo, proteinas, albumina, magnesio y calcio.
Evitar la exposicion ala luz en el caso de bilirrubina.
Algunas pruebas requieren sangre entera (e.g., plomo, cyclosporin, y glycohemoglobin/A1C ). Estos especímenes no deben ser centrifugados. Si está centrifugado accidentalmente, no deseche el espécimen; envíe el tubo centrifugado.
Los tubos de la sangre deben ser mantenidos cerrados siempre. Mantener el tubo una posición cerrada elimina la contaminación exógena posible del espécimen y previene la evaporación y la posibilidad de derramamientos y de aerosoles.
Criterios para el rechazo de muestras

Identificacion inadecuada de la muestra
Volumen inapropiado de sangre
Uso del tubo equivocado
Hemolisis

Preparacion previa al centrifugado

Lo ideal es no usar un separador plástico (palito revolvedor), pero si es necesario, hacerlo con cuidado para evitar la hemolisis. Asegrurarse de tapar el tubo nuevamente luego de este procedimiento. El tubo debe permanecer tapado en todo momento.

Fase de Centrifugado

Las muestras en las que se realizara ionograma, deben permanecer el tiempo necesario para coagular y no se deben centrifugar mas de una vez, ya que se incrementa falsamente el valor de potasio.

Fase post Centrifugado

Cuando sea necesario separa suero o plasma, se debe hacerlo en el menor tiempo posible y con todo el volumen del mismo, no se debe guardar el coagulo restante.
La separación se realizará etiquetando previamente un tubo vacío, y luego de comprobar que se trata de la misma etiqueta en ambos tubos tubos, se separará por volcado.
De cualquier manera esta demostrado, que la mayoria de los analitos, salvo excepciones ya mencionadas, son estables por mas de 24 hs, y al menos por 8 hs a temperatura ambiente. Pasado este tiempo, deben ser refrigerados.
Las muestra para glucosa en neonatos deben ser procesadas inmediatamente, ya que sufren glicolisis mas rapidamente.

Material utilizado durante la centrifugación

1-Tubos con Gel

Permitir que la sangre coagule antes de proceder al centrifugado, una vez realizado, verificar la ausencia de coagulos. Conservar en heladera con el tapón colocado.

REGISTROS Y VALIDACIÓN: LIS, PLANILLAS DE TRABAJO, ETIQUETAS DE CÓDIGO DE BARRAS

	NOMBRE	FECHA	COMENTARIOS
PREPARO:	Rodolfo Miguel	08/05/99
REVISO:	Stella Maris Scacchi	30/07/99
ACTUALIZO: Rev 1.1	Rodolfo Miguel	10/02/14
ACTUALIZO: Rev 1.2	Rodolfo Miguel	27/01/17
REVISO: Rev 1.3	Rodolfo Miguel	02/06/21